Immunologische veranderingen in de ruimte: Het effect van ruimtestressoren op de Th/Th2 balans

In de ruimte is het menselijk lichaam onderhevig aan stressoren zoals kosmische straling, microzwaartekracht en psychologische stress. Al deze ruimtestressoren kunnen een nadelig effect hebben op de verschillende lichaamsfuncties. Eén van deze effecten is een verzwakking van het immuunsysteem. Binnen dit eindwerk wordt specifiek gekeken naar de naïeve CD4+ T-cellen die onderdeel zijn van de specifieke cellulaire afweer. Mijn onderzoek bestond er in om een methode te optimaliseren om naïeve CD4+ T-cellen te isoleren uit de milt van de muis. Deze zuivere cel populatie kan vervolgens tijdens het verdere onderzoek gestimuleerd en gekweekt worden om te kijken naar het effect van ruimtestressoren op T-helper (Th) cellen. Allereerst werd er gekeken of er celdood optrad ten gevolge van het bekomen van een celsuspensie vanuit muizenmilten. Met behulp van een levend/dood kleuring in combinatie met flow cytometrie bleek dat de viabiliteit nog voldoende hoog lag om over te gaan tot naïeve CD4+ T cel isolatie. Hierbij vergeleken we twee kits op basis van de zuiverheid, de concentratie en de viabiliteit van de geïsoleerde cellen. Via flow cytometrie kan besloten worden dat de EasySep Mouse CD4+CD62L+ T Cell Isolation kit van Stemcell Technologies voldeed aan de vereisten. Als laatste werd ook de cultivatie van naïeve CD4+ T-cellen op punt gesteld. Hierbij werd bevonden dat een mengsel van Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 medium met L-glutamine, 4-(2-hydroxyethyl)1-piperazineethanesulfonic acid (HEPES) buffer, natrium pyruvaat, niet-essentiële aminozuren en penicilline/streptomycine geschikt is voor de cultivatie van dit celtype. Het uiteindelijke doel van een antwoord vinden op de vraag “Wat is het effect van ruimte stressoren op de Th-cellen?” is binnen dit eindwerk helaas niet bereikt. Wel is de optimalisatie van het protocol reeds ver gevorderd zodat toekomstige experimenten van voldoende hoge kwaliteit zullen zijn. Mits optimalisatie van de immuun cel stimuli zal kunnen worden overgegaan naar de eigenlijke experimenten.