Rol van een ABC-transporter in de zinkresistentie van Cupriavidus metallidurans

Cupriavidus metallidurans, meer bepaald stam CH34, is een modelorganisme omdat het resistent is tegen meer dan twintig verschillende zware metalen (millimolaire concentraties). C. metallidurans CH34 heeft zijn resistentie tegen zware metalen voornamelijk te danken aan determinanten gelegen op de twee megaplasmiden pMOL28 en pMOL30. Een adaptief evolutie experiment heeft een mutant van C. metallidurans CH34 aan het licht gebracht. Deze mutant is nog beter bestendigd tegen zink als de parentale stam. Onderzoek wees uit dat de transcriptionele regulator van de ABC-transporter (=repressor) gelegen op chromosoom 1 verminderd tot expressie komt in deze mutant. Hierdoor gaat de aanliggende pomp verhoogd tot expressie komen en neemt de zinktolerantie toe. In een eerste uitgevoerde experiment worden de parentele CH34, twee zinkmutanten en twee zelfgemaakte constructen: één met de pomp uitgeschakeld, de andere met een uitgeschakelde repressor opgekweekt in vloeibaar medium waarin ze zijn blootgesteld aan een toenemende zinkconcentratie.  In een tweede experiment wordt een mutant gemaakt waarin de ABC-transporter op het chromosoom vervangen wordt door een tetracycline cassette. Door hierna een zelfgemaakt construct in te brengen waar een complementaire plasmidepomp op ligt, kan relatief eenvoudig achterhaald worden welke rol de specifieke genen van de pomp van de ABC-transporter hebben in de verhoogde zinkresistentie van CH34.